Предварительный анализ природы факторов сыворотки человеческой крови, обладающих бета-лактамазной активностью

Жильцов И.В., Веремей И.С., Семенов В.М., Генералов И.И., Егоров С.К., Полешук Е.Н.

Витебский государственный медицинский университет, Витебск, Беларусь

Антибиотикоустойчивость болезнетворных бактерий считается одной из наиболее актуальных проблем современной инфектологии; тем не менее, до настоящего времени данное явление рассматривалось лишь как свойство микроорганизмов.
В процессе изучения каталитических антител (абзимов), обладающих бета- лактамазной активностью, мы случайно обнаружили необычно высокий уровень пенициллиназной активности плазмы человеческой крови, значительно превышающий таковой у ранее описанных нами абзимов (И.В. Жильцов, 2001). Настоящее исследование было предпринято с целью установить истинную природу факторов, опосредующих высокую бета-лактамазную активность человеческой крови. Мы разделили белки крови на фракции с различным молекулярным весом путем осаждения сульфатом аммония в концентрациях 33%, 40% и 50%; производился анализ как осадка, так и надосадка. Кроме того, в исследование были включены пробы нативной сыворотки крови. Все пробы диализовались трехкратно против 0,85% раствора NaCl. Бета-лактамазная активность проб определялась при помощи модифицированного неокупроинового метода (A. Menashi, 1988), концентрация белка в пробе - по методу Лоури (O.H. Lowry, 1951). Диализ производился с использованием диализных мешков Sigma D6191-25ЕА с порами, пропускающими белки с молекулярной массой менее 12 кДа. Оказалось, что в сыворотке человеческой крови содержатся минимум две фракции, обладающие пенициллиназной активностью: «легкая», опосредующая около 90% всей бета-лактамазной активности крови, с молекулярной массой частиц менее 12 кДа, и «тяжелая», обусловливающая около 10% всей бета-лактамазной активности крови. Данная фракция, вероятно, почти исключительно представлена гамма-глобулинами.
Полученные нами сведения дают ценный ключ к пониманию механизма бета- лактамазной активности крови, а также позволяют планировать дальнейший ход исследований по идентификации факторов, опосредующих эту активность.